常用腺病毒载体的包装方法包括：
1) 经典的同源重组法（双质粒共转染）：原理是同源重组。在腺病毒左臂区域（通常缺失E1基因区）插入目的基因表达盒构成腺病毒穿梭质粒，与带有腺病毒全基因组（通常缺失E1基因区）的大质粒共同转染携带E1基因区的细胞如293细胞，两种质粒在293细胞内通过同源重组形成重组腺病毒基因组，并包装成病毒颗粒。主要缺点是重组效率比较低。
2)
Ad-Easy法：原理是通过同源臂重组的方式在细菌中获得重组腺病毒基因组质粒。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的质粒共转化RecA+细菌，在细菌RecA重组酶的作用下经抗性筛选获得重组腺病毒基因组质粒，将其线性化后转染293细胞获得重组病毒。
3)
AdMax包装系统：通过Cre/loxP获得重组病毒，这个过程发生在293细胞中，从而避免在细菌中重组。将克隆了外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带了腺病毒大部分基因组的包装质粒共转染293细胞，利用Cre/loxP系统的作用实现重组，产生重组腺病毒。这个系统有多种优势，包括操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高（一般大于10（4）vp/cell）、目的基因的表达水平高（因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍）等。鉴于这些特点，本公司推荐用AdMax包装系统制备腺病毒载体。AdMax系列有多种（详见“AdMax系统构建腺病毒载体的常见问题解答”），其中最常用的是AdMax
kit D。>>> AdMax腺病毒载体构建操作指南（英文）[pdf]
4）Ad5/F35MaxTM包装系统：本公司凭借丰富的病毒基因载体研发经验，在AdMax包装系统基础上建立了Ad5/F35MaxTM载体包装系统。Ad5/F35是Ad5的病毒纤突（Fiber）被改造成35型腺病毒纤突的嵌合型腺病毒载体。其基因组中仅有fiber是嵌合的，其它的基因仍旧保留了Ad5载体的特征。其包装系统包括pBHG-fiber5/35骨架质粒，穿梭质粒，HEK293细胞。其原理与AdMax系统相似。pBHG-fiber5/35骨架质粒可以与带有loxP位点的穿梭质粒配合，通过Cre-loxP，使转染进HEK-293细胞的穿梭质粒和骨架质粒发生定点重组，产生带有外源基因的重组腺病毒（Ad5/F35），这样得到的重组病毒是E1缺失的复制缺陷型腺病毒，病毒在不能够提供E1区的细胞中只能实现外源基因的表达而本身不具备增殖能力。Ad5/F35MaxTM腺病毒包装系统的特点是通过重组酶在真核细胞内完成重组出毒，不仅保留了AdMax系统出毒快、稳定性好、产率高等优点，而且感染细胞的范围更广、感染效率更高，对各种造血细胞和肿瘤细胞的感染效率高于普通Ad5、外源基因表达量更多，包装系统高效且稳定，是目前最方便快捷的腺病毒（Ad5/F35）包装系统。>>> 新型腺病毒载体Ad5/F35简介 |
